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  2. 產品詳情
    所在位置: 首頁> 產品目錄> 細胞株>
    • 產品名稱:REM

    • 產品型號:
    • 產品廠商:佰曄生物
    • 產品文檔:
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    簡單介紹:
    REM
    詳情介紹:

    大鼠胚胎皮膚成纖維細胞產品基本信息

    細胞名稱: REM, 大鼠胚胎皮膚成纖維細胞
    種屬來源: SD大鼠
    組織來源:
    胚胎,皮膚
    細胞形態: 成纖維細胞樣
    生長特性: 貼壁生長
    培養基: DMEM(內含2mM L-glutamine)+10%胎牛血清(FBS).
    生長條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%; 溫度:37 ℃, 
    傳代方法: 1:2至1:6,每周2次。
    凍存條件: 90% 完全培養基+10% FBS,液氮儲存
    支原體檢測: 陰性
    應用: 該細胞可以作為轉染宿主細胞。
    細胞鑒定:
    免疫組化顯示波形蛋白(Vimentin)抗體陰性;結蛋白(Desmin)抗體陽性。

    REM大鼠胚胎皮膚成纖維細胞接受后處理

    1)  收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發給我們。
     
    2)  請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態,去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
     
    3)  棄去T25瓶中的培養基,添加6ml本公司附帶的完全培養基。
     
    4)  如果細胞密度達80%-90%請及時進行細胞傳代,傳代培養用6ml本公司附帶的完全培養基。
     
    5)  接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發現污染或疑似污染,請及時與我們取得聯系。
     

    REM大鼠胚胎皮膚成纖維細胞培養操作

    1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。**天換液并 檢查細胞密度。
     
    2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
     
         1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
     
         2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消 化。
         
         3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
     
         4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
     
    3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
     
          1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
     
          2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍存管做好標識。
     
         3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

    REM大鼠胚胎皮膚成纖維細胞培養注意事項

    1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現 象發生請及時和我們聯系。
     
    2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所 需細胞因子等,確保細胞培養條件一致。若由于培養條件不一致而導致細胞出現問 題,責任由客戶自行承擔。
     
    3.   用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶壁脫落,將細胞置于培養箱內靜置培養 4~6 小時,再取出觀察。此時多數細胞均 會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常, 請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養;如果染色結果顯示細胞無活力,請拍下 照片及時和我們聯系,信息確認后我們為您再免費寄送一次。
     
    4.   靜置細胞貼壁后,請將細胞瓶內的培養基倒出,留 6~8mL 維持細胞正常培養,待細 胞匯合度  80%左右時正常傳代。
     
    5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用,細胞 傳代時可以一定比例和客戶自備的培養基混合,使細胞逐漸適應培養條件。
     
    6.   建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和 Procell 技術 部溝通交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯 系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
     
    7. 該細胞僅供科研使用。



    大鼠胚胎皮膚成纖維細胞產品說明書pdf版和相關資料下載

    大鼠胚胎皮膚成纖維細胞產品應用舉例

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